Американские ученые из Исследовательского института Скриппс разработали технологию, которая упрощает процесс кларификации тканей. Ткани организма становятся прозрачными, и исследователи могут визуализировать нормальные и патологические процессы в крупных образцах и системах органов. Исследование опубликовано в журнале Nature Methods.
Исследователи используют кларификацию тканей с помощью растворителей, чтобы удалить некоторые молекулы, такие как жиры, и сделать ткани прозрачными. При этом белки и большая часть структур в тканях должны остаться нетронутыми. Ученые часто используют флуоресцентные метки на генах или других интересующих их молекулах, присутствующих в организме лабораторного животного. Кларификация тканей позволяет визуализировать их расположение. Методы кларификации стали разрабатывать около 15 лет назад, в основном для изучения нейронных связей в мозге. Для этого ученые используют органические или водные растворители. Первые действуют быстрее и эффективнее, но могут снизить интенсивность флуоресцентных сигналов. Вторые же сохраняют флуоресцентные метки, но довольно слабо кларифицируют ткани. Оба известных метода довольно трудоемки и тяжелы. Кроме того, в них часто используются опасные вещества.
Исследователи разработали новый метод, названный HYBRiD. В нем последовательно используются органические и водные ПАВ. Водные гидрогели используют для защиты тех молекул в тканях, которые необходимо сохранить. При этом в данном методе не нужно прокачивать растворитель через весь образец. Его достаточно погрузить в емкость с рабочей смесью и оставить на шейкере.
Простоту и удобство нового метода ученые показали на нескольких примерах. Так, в коллаборации с другими исследователями они впервые провели визуализацию зараженных вирусом SARS-CoV-2 клеток в целой груди мышей. Благодаря легкости метода процедуру кларификации ткани удалось сделать в лаборатории высокого уровня биобезопасности, где ограничен доступ к оборудованию.
В настоящее время ученые работают над другими коллаборациями, которые помогут показать сферы применения нового метода. В частности, исследователи хотят визуализировать прохождение нервов в теле.
Подписывайтесь на InScience.News в социальных сетях: ВКонтакте, Telegram, Одноклассники.
